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CST抗體說明書

 更新時(shí)間:2025-04-18    點(diǎn)擊量:153

一、產(chǎn)品概述

CST抗體以高特異性、靈敏度和穩(wěn)定性著稱,廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)功能研究、信號通路分析及疾病機(jī)制探索。其核心產(chǎn)品線包括XP®系列兔單克隆抗體(采用XMT®技術(shù)開發(fā))和經(jīng)嚴(yán)格驗(yàn)證的多克隆抗體,覆蓋腫瘤標(biāo)志物、磷酸化修飾蛋白、細(xì)胞周期調(diào)控因子等靶點(diǎn)。

CST抗體說明書

二、產(chǎn)品組成與規(guī)格

  1. 抗體形式

    • 液體抗體:含50%甘油緩沖液(避免凍融),直接使用無需復(fù)溶。

    • 凍干抗體:需用推薦緩沖液(如無菌水或含BSA的PBS)復(fù)溶。

  2. 包裝規(guī)格

    • 常見規(guī)格:20μL、100μL、200μL、1mL。

    • 配套試劑:推薦使用CST推薦的封閉液、二抗及顯色試劑(如SignalStain®系列)。

三、儲存條件與有效期

  1. 儲存溫度

    • 未開封抗體:-20℃保存(含甘油,保持液態(tài));偶聯(lián)抗體(如HRP標(biāo)記)需4℃保存。

    • 開封后抗體:建議分裝后-20℃保存,避免反復(fù)凍融(注:CST不建議分裝,若必須分裝需確保無菌操作)。

  2. 有效期

    • 單組分抗體:以管身“Ref:"后的灌裝日期為起始,通常為2年。

    • 試劑盒:以條形碼標(biāo)簽日期為準(zhǔn),凍干細(xì)胞因子產(chǎn)品需在購買后12個(gè)月內(nèi)使用。

四、使用方法

1. 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

  • 查閱說明書:確認(rèn)抗體的應(yīng)用范圍(如WB、IHC、IF)、推薦稀釋比例及種屬反應(yīng)性(如人、小鼠、大鼠)。

  • 樣本處理

    • 細(xì)胞裂解液:推薦使用CST專用裂解緩沖液(如RIPA Buffer),加入蛋白酶/磷酸酶抑制劑。

    • 組織樣本:福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)樣本需按說明書進(jìn)行抗原修復(fù)。

2. 推薦操作流程

  • Western Blot(WB)

    1. 上樣量:20-30μg總蛋白,使用12% SDS-PAGE膠分離。

    2. 轉(zhuǎn)膜:濕轉(zhuǎn)法,推薦0.2μm硝酸纖維素膜(NC膜)。

    3. 封閉:5%脫脂牛奶(貨號#9999)室溫封閉1小時(shí)。

    4. 一抗孵育:4℃過夜(磷酸化抗體需延長反應(yīng)時(shí)間)。

    5. 二抗:抗兔/鼠HRP標(biāo)記二抗(貨號#7074/#7076),室溫孵育1小時(shí)。

  • 免疫組化(IHC)

    1. 抗原修復(fù):推薦檸檬酸緩沖液(pH6.0)高壓修復(fù)。

    2. 阻斷:3% H?O?處理10分鐘,5% BSA封閉。

    3. 顯色:DAB或SignalStain®顯色試劑。

五、注意事項(xiàng)

  1. 購買渠道

    • CST代理——天津益元利康生物科技有限公司,提供CST抗體、試劑盒等,確保正品及售后支持。

  2. 抗體分裝禁忌

    • 分裝可能導(dǎo)致濃度不均、污染或活性損失,CST不承擔(dān)分裝后質(zhì)量問題。

  3. 實(shí)驗(yàn)優(yōu)化建議

    • 磷酸化抗體:需嚴(yán)格驗(yàn)證樣本刺激條件(如EGF處理15分鐘激活A(yù)kt)。

    • 多色流式:搭配CompBeads微球調(diào)節(jié)熒光補(bǔ)償,避免通道干擾。

  4. 常見問題排查

    • 無信號:檢查樣本中靶蛋白表達(dá)水平(參考UniProt或BioGPS數(shù)據(jù)庫),確認(rèn)抗體稀釋比例及孵育時(shí)間。

    • 高背景:縮短封閉時(shí)間,更換封閉液(如BSA替代脫脂牛奶)。

附錄:推薦配套試劑

試劑類型推薦產(chǎn)品(貨號)應(yīng)用場景
封閉液SignalStain® Blocking Buffer (#12454)WB/IHC/IF
二抗Anti-Rabbit IgG HRP (#7074)WB/IF
顯色試劑SignalStain® DAB (#8059)IHC

注:更多產(chǎn)品信息請聯(lián)系天津益元利康生物科技有限公司。

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