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如何選擇合適的培養(yǎng)基?

 更新時間:2023-10-31    點擊量:873

培養(yǎng)細胞的重要環(huán)節(jié)有很多,其中很重要的一步就是為細胞選擇適合的生長環(huán)境,為其選擇成分適合又營養(yǎng)豐富的細胞培養(yǎng)基。細胞培養(yǎng)基是供給細胞營養(yǎng)、維持細胞生長和增殖的多種營養(yǎng)物質(zhì)的混合物,種類一般包括經(jīng)典/基礎(chǔ)培養(yǎng)基、無血清培養(yǎng)基以及化學(xué)成分確定的培養(yǎng)基等。那么該如何選擇合適的培養(yǎng)基呢?讓我們一起來看看吧!

1.RPMI-1640培養(yǎng)基

RPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞,雜交瘤細胞的培養(yǎng),是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、DaudiIM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。

2. MEM培養(yǎng)基

也稱zui低必需培養(yǎng)基,它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單,可廣泛適應(yīng)各種已建成細胞系和不同地方的哺乳動物細胞類型的培養(yǎng)。MEM-Alpha一般用于培養(yǎng)一些難培養(yǎng)細胞類型,而其它沒有特殊之處的細胞株則幾乎均可采用MEM來培養(yǎng)。

3.DMEM-高糖培養(yǎng)基

是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基,可用于許多哺乳動物細胞培養(yǎng),更適合高密度懸浮細胞培養(yǎng)。適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yǎng),也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞的培養(yǎng)。

5.DMEM/F12

DMEM/F12培養(yǎng)基適于克隆密度的培養(yǎng)。F12培養(yǎng)基成分復(fù)雜,含有多種微量元素,和DMEM1:1結(jié)合,稱為DMEM/F12培養(yǎng)基(DME/F12medium),作為開發(fā)無血清配方的基礎(chǔ),以利用F12含有較豐富的成分和DMEM含有較高濃度的營養(yǎng)成分為優(yōu)點。該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細胞培養(yǎng)。為了增強該培養(yǎng)基的緩沖能力,改良之一是在DMEM/F121:1)中加入15mM HEPES緩沖液。

6.McCoys 5A

McCoys 5A Medium主要為肉瘤細胞的培養(yǎng)所設(shè)計,可支持多種(如骨髓、皮膚、肺和脾臟等)的原代移植物的生長,除適于一般的原代細胞培養(yǎng)外,主要用于作組織活檢培養(yǎng)、一些淋巴細胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細胞的生長支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細胞、人淋巴細胞、HT-29BHL-100等上皮細胞。

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